Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關(guān)
Taq DNA Polymerase 是從克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化的，其分子量為94 KD。 Taq DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′外切核酸酶活性，無 3′-5′外切酶活性。Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關(guān)
Taq DNA Polymerase (Buffer 含 Mg2+)
Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關(guān)
目錄號(hào)：71011
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 71011-0500 | 71011-03000 |
Taq DNA Polymeras（5U/µl） | 500 U | 3000 U |
10× Taq Buffer+（with Mgcl2） | 1 ml | 6×1ml |
保存條件
-20℃保存，有效期 2 年。
經(jīng)常使用，可置于 4 °C 保存，有效期 3 個(gè)月。
產(chǎn)品簡介
Taq DNA Polymerase 是從克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化的，其分子量為94 KD。 Taq DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′外切核酸酶活性，無 3′-5′外切酶活性。在PCR反應(yīng)中，Taq DNA Polymerase 延伸速度為1-2 kb/ 分鐘，產(chǎn)物3′端帶A，可直接用于TA載體克隆（Cat#V114）。
活性單位:
1 單位（U）Taq DNA Polymerase 活性定義為在 74℃、30 分鐘內(nèi)，
以活性化的大馬哈魚精子 DNA 作為模板引物，將 10 nmol 脫氧核苷酸摻入
到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。
質(zhì)量控制:
SDS-PAGE 檢測純度大于 99%，經(jīng)檢測無外源核酸酶活性；PCR 方法 檢測無宿主殘余 DNA，能有效地?cái)U(kuò)增人基因組中的單拷貝基因；室溫存放一 周，無明顯活性改變。
酶貯存緩沖液：
20mM Tris-HCl (pH8.0)，0.1 mM EDTA，1mM DTT，100 mM KCl，Stabilizers，50% glycerol。
10×Taq Buffer (含Mg2+)：
200 mM Tris-HCl (pH 8.4)，200 mM KCl， 100 mM(NH4)2 SO4，15 mM MgCl2，其他成分。
適用范圍：
一般用于DNA片斷的PCR擴(kuò)增、DNA標(biāo)記、引物延伸、序列測定、平末端加A等，產(chǎn)物可以直接用于TA載體克隆。
Taq DNA Polymerase 的使用說明：
一、配制 PCR 反應(yīng)體系：(于冰上配制)
Component | 20 μl Reaction | 50 μl Reaction | 終濃度 |
Template DNA | as required | as required | 10pg-0.5μg |
Forward Primer (10 M) | 0.4 μl | 1 μ | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
10×Buffer+（withmgcl2） | 2 μl | 5 μ | 1 × |
dNTP Mixture(各2.5mM) | 1.6 μ | 4 μl | 0.2 μM |
Taq DNA polymerase(5U/μl) | 0.2-0.4 μl | 0.5-1 μl | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μ |
參考模板用量（50 μl 反應(yīng)體系）：
質(zhì)粒：0.1-10 ng；細(xì)菌基因組：10-100 ng；人類基因組：50-150 ng；cDNA：1-5 μl from RT。
一、 設(shè)置 PCR 循環(huán)條件：（請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)調(diào)整）
Step | Temperature | Tim | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 30 seconds | 30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 30 seconds | |
Extension | 72℃ | 1-2 kb / minute | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
三、結(jié)果檢測：反應(yīng)結(jié)束后取 5 µl 反應(yīng)產(chǎn)物，瓊脂糖凝膠電泳檢測。
Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關(guān)
北京諾博萊德科技有限公司始創(chuàng)于2012年，總部位于北京海淀區(qū)，專注于科研生物領(lǐng)域，是一家研發(fā)、銷售和服務(wù)于一體的企業(yè)。公司秉承“誠信為本，博采眾長"的發(fā)展理念，致力于為科研工作者提供高質(zhì)量的生物產(chǎn)品和服務(wù)。
諾博萊德的產(chǎn)品覆蓋面廣泛，包括以下
生化試劑：抗生素、蛋白質(zhì)、染色劑、細(xì)胞培養(yǎng)基、緩沖試劑、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)品、磁珠、維生素、酶和輔酶、分離試劑、表面活性試劑、碳水化合物；
即用型試劑：常規(guī)試劑溶液、即用型染色液、免疫學(xué)試劑、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、檢測試劑盒、細(xì)胞分離液人或其他動(dòng)物細(xì)胞、熒光定量、蛋白酶系列；
通用耗材：超濾離心管、吸頭/盒、離心管/盒、封板膜、PCR耗材、濾紙、口罩手套、冷凍存管/盒、培養(yǎng)板/皿/瓶、酶標(biāo)條/板、巴氏吸管、載玻片、蓋玻片、包埋/盒/模具、封片劑、刀片、石蠟、印跡膜、藍(lán)蓋瓶、研磨器材、透析袋/夾子、血凝板、記號(hào)筆、注射器、加樣槽、取樣杯、細(xì)胞篩網(wǎng)、細(xì)胞刮刀/鏟、單道多道手動(dòng)自動(dòng)移液器/支架、防卷板等產(chǎn)品被國內(nèi)科研工作者廣泛應(yīng)用。
